Быстрая и чувствительная диагностика сепсиса теперь может быть проведена с помощью двухфазной амплификации в высушенной матрице крови

Можно ли диагностировать инфекцию кровотока за 2,5 часа

Инфекции кровотока (BSI) и сепсис приводят к высокой заболеваемости и смертности, особенно у пациентов в критическом состоянии и новорожденных. Результаты лечения пациентов можно значительно улучшить, если назначать антибиотики в течение трех часов после появления первых симптомов, но современные методы диагностики требуют гораздо больше времени для диагностики BSI/сепсиса.

В настоящее время золотым стандартом диагностики является проведение посева крови (который занимает до пяти дней для получения отрицательного результата) с последующей ПЦР. Отсутствие точного, своевременного диагноза также приводит к назначению антибиотиков широкого спектра действия, что способствует появлению патогенов, устойчивых к лекарственным препаратам.

Чтобы решить проблему медленного получения результатов и других проблем с текущими диагностическими тестами, одобренными FDA, исследователи из Иллинойса применили подход обработки цельной крови. В начале октября, опубликованном в PNAS, описывается модуль обработки крови с пористой микрофлюидной и нанофлюидной сетью в высушенной матрице крови. В этой матрице полимераза может получить доступ к ДНК и инициировать «двухфазную амплификацию», где фон гема остается ограниченным твердой фазой, в то время как ампликоны обогащаются в прозрачном супернатанте, что позволяет обнаруживать флуоресцентные изменения с чувствительностью к одной молекуле.

Исследователи подтвердили свой анализ на 63 клинических образцах, правильно идентифицировав все образцы без ложных положительных или отрицательных результатов по сравнению с золотым стандартом, что привело к чувствительности и специфичности 100 процентов. Среди множества патогенов, которые они смогли обнаружить, используя всего 0,8 мл — 1,0 мл исходного объема крови, были грамположительные метициллин-резистентные и метициллин-чувствительные бактерии Staphylococcus aureus (MRSA и MSSA), грамотрицательные бактерии E. coli и Candida albicans (оппортунистический дрожжевой грибок). Важно, что этот двухфазный подход без культивирования сократил время от образца до результата диагностики BSI/сепсиса с более чем 20 часов до менее 2,5 часов, что может иметь существенное значение в условиях ограниченных ресурсов и для критических пациентов, требующих принятия срочных решений о лечении.

Цитата из статьи доктора философии (PDF) ЗАХРАА ЧОРГАЙ по клинической лабораторной работе.